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蜀科低速冷冻离心机分离β-胡萝卜素
发布时间:2017-07-14 08:08:11点击:109评论:0字体:T|T
β—胡萝卜素是一种抗氧化剂,具有解毒作用,是维护人体健康不可缺少的营养素,在抗癌、预防心血管疾病、白内障及抗氧化上有显著的功能,并进而防止老化和衰老引起的多种退化性疾病。蜀科低速冷冻离心机可以有效分离β-胡萝卜素,是各科研机构和生物公司开展研究、生产的好帮手。接下来小编为大家介绍分离的过程。
叶绿素厂在提取叶绿素后的废液小含有一定量胡萝卜素,而且由于叶绿素被提取,在利用离心机分离胡萝卜素时.可以减少叶绿素对胡萝卜素的干扰。因此,这是比较好的提取胡萝卜素的原料。胡萝卜素常用的分离方法是氧化铝柱层析。
1.废液的预处理
取叶绿素厂废液5mL于离心管中,置于蜀科低速冷冻离心机中,进行平衡操作后,1000 r/min离心15min。取上层黄色液体于50ml梨形分液漏斗中。加25ml石油醚(沸程为30一60℃),充分混匀。
2.氧化铝层析柱的准备
取100g氧化铝于灰化炉中加热至400℃,保持3h,使水分完全蒸发成活性氧化铝。此时的氧化铝为Ⅰ级,适当吸收空气中的水分(约3%)后,成Ⅱ级,然后,用石油醚将活性氧化铝调制成糊状,备用。另取1支20 mm×300 mm的玻璃层析柱,关闭阀门,加入三分之一体积的石油醚、再将糊状的话性氧化铝慢慢地加入到玻璃层析柱中,同时打开层析柱的阀门,让其中的石油醚慢慢地流出,有利于氧化铝的沉降。当氧化铝装至层析柱的8D%时,停止加氧化铝,待氧化铝完全沉降。
3.加样层析和洗脱
装好层析柱,同时打开层析柱的阀门和分液漏斗的阀门,使分液漏斗中的样品慢慢地加入到氧化铝层析柱中。观察氧化铝由于加入样品后颜色的变化。当前沿的颜色伸展至柱高度的二分之一时,关闭分液漏斗和层析柱的阀门,停止加样。另取1个250mL分液漏斗,内装石油醚:丙酮=9:l的混合溶液作为洗脱剂,安装好层析装置,分别打开分液漏斗和层析柱的阀门,让洗脱剂慢慢流经层析柱。当颜色前沿到达层祈柱底部时,注意观察并记录色带的分离情况。第一条带(从底部往上数),是α-胡萝卜素,第二条带是β-胡萝卜素,第三条带是γ—胡萝卜素,再往上是其他类胡萝卜素及其他色素。本实验要求收集β-胡萝卜素组分。用50mL烧杯收集β-胡萝卜素洗脱液。
4.沉淀
将洗脱液于50℃水浴中加热使溶剂挥发.然后,在残留物中加lv仿使之溶解后再用乙醇沉淀,如发现有白色沉淀物质产生,还需用蜀科低速冷冻离心机,控制转速在2000r/min状态下进行离心将其去除。在上清液中再加乙醇,得到的棕褐色沉淀,即为β-胡萝卜素。称量,记录总重量。
蜀科低速冷冻离心机使用非常广泛,了解更多应用案例,请继续关注蜀科仪器相关网站。
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